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固相萃取 (SPE) 系統(tǒng)

聯(lián)用技術(shù)領(lǐng)域的**發(fā)展

聯(lián)用技術(shù)領(lǐng)域的**發(fā)展是使用固相萃取 (SPE) 系統(tǒng)作為液相色譜 (LC) 與 NMR 之間的接口。

循環(huán)收集和轉(zhuǎn)移（BPSU-36/2）是 LC-NMR 中常用的分析技術(shù)。但是，樣品是在色譜系統(tǒng)提供的原始洗脫液和濃度狀態(tài)下進(jìn)行測(cè)量的。（質(zhì)子化的）洗脫液對(duì)有限進(jìn)樣量導(dǎo)致的低濃度樣品的干擾是無(wú)法避免的。

在LC-SPE NMR 過(guò)程中，色譜儀完成分離，相應(yīng)的峰則被一一固定在色譜柱后的固相萃取柱上。

峰選擇是通過(guò) UV 檢測(cè)器或通過(guò)在線的 MS 或 MSn 譜圖完成。被固定的色譜峰樣品可進(jìn)行 NMR 測(cè)量（洗滌、干澡 ...），NMR 波譜儀配備了一個(gè)特殊的流動(dòng)探頭，并通過(guò)毛細(xì)管連接到固相萃取系統(tǒng)。色譜峰樣品借助適當(dāng)?shù)模按┤軇┩ㄟ^(guò)毛細(xì)管直接流入 NMR 探頭。

特點(diǎn)

色譜分離可以借用廉價(jià)的非氚代溶劑，甚至是與 NMR 波譜不兼容的添加劑

由于洗脫劑中沒(méi)有D2O ，色譜分離過(guò)程中就沒(méi)有 H-D 交換產(chǎn)生，從而能夠獲得正確的質(zhì)量信息

轉(zhuǎn)移僅需要小量（大約 300 微升）氚代溶劑。

完整樣品是被固相萃取柱中的少量體積的（小于 30 微升）液體洗脫的。由于這種富集效應(yīng)，檢測(cè)靈敏度增加 2 至 4 倍，尤其是對(duì)于更寬的峰而言這種效果更好。

通過(guò)色譜分離后的相同樣品的多次富集，樣品量和濃度會(huì)進(jìn)一步增加，靈敏度能夠提高 10 倍或以上。

于洗脫和轉(zhuǎn)移的氚代溶劑不受色譜條件的影響，可以提高譜圖質(zhì)量，能夠在 NMR 觀察到可交換質(zhì)子。

對(duì)于此類型的分析，布魯克公司現(xiàn)在提供一個(gè)完整的 SPE-NMR 系統(tǒng)。該系統(tǒng)包括:

布魯克∕Spark Prospekt II 固相萃取系統(tǒng)。

HyStar 軟件包，在自動(dòng)化條件下控制整個(gè)流程。

流動(dòng) NMR 探針，其檢測(cè)容量可根據(jù)樣品洗脫峰的體積進(jìn)行調(diào)整。

這種新系統(tǒng)為 LC 和 NMR 的聯(lián)用打開(kāi)了新局面：

對(duì)濃度要求較高的 LC-NMR 的異核實(shí)驗(yàn)之前僅可能在有限的案例中進(jìn)行，但是現(xiàn)在已經(jīng)成為標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)。

HSQC 和 HMBC 等類型實(shí)驗(yàn)使得利用 LC-(SPE) NMR 進(jìn)行完全未知物的結(jié)構(gòu)鑒定成為現(xiàn)實(shí)，這項(xiàng)技術(shù)可以用于諸如植物提取物的篩選。

鑒于 LC-NMR 主要用在場(chǎng)強(qiáng)為 500 MHz 和更高的磁場(chǎng)，借助 SPE，LC 和 NMR 的聯(lián)用在較低強(qiáng)度磁場(chǎng)的應(yīng)用前景更為廣闊。