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色譜與 NMR的對(duì)接

結(jié)合質(zhì)譜法與色譜法的聯(lián)用分析技術(shù)是一種成熟的實(shí)驗(yàn)室工具。 色譜法與 NMR 相結(jié)合也成了一種有力的實(shí)驗(yàn)室分析工具。它們的進(jìn)一步發(fā)展甚至是將所有三種技術(shù)融入到一個(gè) LC-NMR/NMR-MS 系統(tǒng)中，同時(shí)將固相萃取作為色譜法與 NMR 的有效對(duì)接引入。兩種不同的主工作流有望相結(jié)合。

色譜系統(tǒng)可以直接連接到 NMR 波譜儀。樣品按“原樣”轉(zhuǎn)移到 NMR，保持著色譜系統(tǒng)提供的濃度和溶劑。樣品可以在色譜分離過程中轉(zhuǎn)移，隨后 NMR 圖譜可以通過流動(dòng)模式（持續(xù)不斷，當(dāng)色譜儀在運(yùn)行時(shí)）或停止流動(dòng)模式（選定峰在NMR 探頭中暫停，色譜儀亦暫停）獲得。

在一個(gè)更復(fù)雜的程序中，在色譜分離結(jié)束后，選定的樣品將在樣品池中立即暫停，然后轉(zhuǎn)移到 NMR。在此程序中，對(duì)樣品的處理已降至*低。這意味著在注入混合物后，分離的化合物將轉(zhuǎn)移到 NMR，不需要接觸空氣或光，也不需要對(duì)樣品進(jìn)行任何手動(dòng)處理。此外，分離與 NMR 測(cè)量開始之間的間隔可縮短至 10 秒。

布魯克公司的 LC-NMR 系統(tǒng)是追求靈敏度和檢測(cè)不穩(wěn)定化合物的理想之選，可以進(jìn)行全面自動(dòng)化的分析，亦可簡(jiǎn)單地為從 LC 分離到 NMR 結(jié)果提供一個(gè)十分便捷的方法。

在 LC-NMR 的**發(fā)展中，固相萃取柱被用于在色譜分離后固定選定的峰。色譜溶劑被清除，樣品被全氚代溶劑洗脫，從固相萃取柱中轉(zhuǎn)移到 NMR 流動(dòng)探頭或轉(zhuǎn)移到標(biāo)準(zhǔn) NMR 樣品管中。

固相萃取柱上的標(biāo)準(zhǔn)捕獲∕洗脫過程提供的樣品濃度，相對(duì)于 LC-NMR，其靈敏度可以提升 100%。此外，色譜儀可以在樣品進(jìn)入 NMR 之前多次進(jìn)樣，在固相萃取柱上進(jìn)行反復(fù)富集。這樣可就以更容易地進(jìn)行要求更苛刻的反向?qū)嶒?yàn)，亦可為超低濃度的化合物檢測(cè)提供足夠的實(shí)驗(yàn)。

布魯克公司的 LC-SPE-NMR系統(tǒng)可通過富集樣品，大幅增加 NMR譜圖的信噪比。這使得其在更加嚴(yán)苛的反向?qū)嶒?yàn)或研究低濃度雜質(zhì)時(shí)，可以進(jìn)行非常完整的結(jié)構(gòu)鑒定。此外，全氚代溶劑為 NMR 圖譜的獲取提供了標(biāo)準(zhǔn)條件。

與 NMR 探頭相結(jié)合 - 流動(dòng)探頭和 CryoFit

對(duì)于直接連接的 LC-(SPE)-NMR/MS 系統(tǒng)的 NMR 實(shí)驗(yàn)，流動(dòng)探頭是必須的。布魯克拜厄斯賓公司已經(jīng)開發(fā)了一系列高分辨率流動(dòng) NMR 探針，具有****的靈敏度，而 NMR 配置就像正常的 5 毫米 NMR 探頭一樣（包括反向模式、 TXI、 Z方向梯度、ATMA 等）。它們有一個(gè)內(nèi)置流動(dòng)池，可提供不同尺寸。

CryoProbes™ 在樣品管操作模式下可將靈敏度大幅提高 3-4 倍。布魯克公司提供一種 CryoFit™，可將任何標(biāo)準(zhǔn)的 5 毫米 CryoProbe 轉(zhuǎn)變成流動(dòng)探頭。轉(zhuǎn)換僅需幾分鐘，并且是在 CryoProbes 在磁體中和冷卻的狀態(tài)下進(jìn)行的。預(yù)熱∕冷卻時(shí)不需要停機(jī)。