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NEPA21高效基因轉(zhuǎn)染儀------適用于體外(In Vitro)和活體(In Vivo)
NEPA GENE公司專(zhuān)業(yè)研發(fā)、生產(chǎn)細(xì)胞電轉(zhuǎn)染儀及電融合儀等,其生產(chǎn)CUY21系列電轉(zhuǎn)染儀在研究領(lǐng)域中久負(fù)盛名,已被數(shù)百篇文獻(xiàn)引用,其中不乏高水平雜志的文章,如Nature、Cell、PNAS、Genes & Dvelopment等。
2011年,NEPA GENE推出新一代全能型NEPA21高效基因轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。與傳統(tǒng)的電轉(zhuǎn)儀相比,NEPA21采用全新設(shè)計(jì)的電轉(zhuǎn)程序,特別適用于難轉(zhuǎn)染細(xì)胞、離體組織或動(dòng)物活體的轉(zhuǎn)染。配合獨(dú)有的電壓衰減(Voltage Decay)設(shè)計(jì),NEPA21可在獲得高轉(zhuǎn)染效率的同時(shí),提高細(xì)胞存活率。
電轉(zhuǎn)染主要特點(diǎn):
全新的四步法電轉(zhuǎn)程序
特別適用于難轉(zhuǎn)染細(xì)胞、離體組織或動(dòng)物活體的轉(zhuǎn)染
高轉(zhuǎn)染效率、高細(xì)胞存活率
電轉(zhuǎn)程序各項(xiàng)參數(shù)可見(jiàn)、可調(diào),適用性廣
不需要特殊的轉(zhuǎn)染試劑盒輔助,運(yùn)維成本低
熱點(diǎn)應(yīng)用:受精卵\ 胚胎的基因編輯
1、體外受精卵電轉(zhuǎn)
與顯微注射相比,NEPA21特有的電極可在體外單次電擊可實(shí)現(xiàn)幾枚至一百多枚的受精卵基因編輯,工作效率大大提高,目前已應(yīng)用于鼠卵、魚(yú)卵、爪蟾、蠶卵、絨猴等。
2、宮內(nèi)胚胎電轉(zhuǎn)
3.i-GONAD 技術(shù)體內(nèi)受精卵電轉(zhuǎn)
受精卵顯微注射法或體外電穿孔法, 是目前常見(jiàn)的KO/KI動(dòng)物的方法。然而,這些技術(shù)需要費(fèi)時(shí)費(fèi)力的體外處理,包括受精卵分離、基因?qū)搿Ⅲw外培養(yǎng)、胚胎移植到孕母鼠等繁瑣復(fù)雜流程。Dr. Makoto Matsuyama實(shí)驗(yàn)室開(kāi)發(fā)了一種簡(jiǎn)單高效的體內(nèi)電轉(zhuǎn)方法,稱(chēng)為i-GONAD,通過(guò)直接在孕鼠輸卵管壺腹部電轉(zhuǎn)染的方式完成受精卵轉(zhuǎn)染,不需要上述復(fù)雜的體外處理。目前i-GONAD法成功進(jìn)行小鼠、大鼠基因編輯,也有望應(yīng)用于其它哺乳動(dòng)物,如豚鼠、倉(cāng)鼠、牛、豬、猴等。
全新的四步法電轉(zhuǎn)程序:
一:電穿孔模式
高電壓、持續(xù)時(shí)間短、多次脈沖、電壓衰減
有效地在細(xì)胞膜上形成小孔,且對(duì)細(xì)胞損傷小
二:反向電穿孔模式
用于原位貼壁細(xì)胞/組織的轉(zhuǎn)染,有效提高穿孔率!
三:基因?qū)肽J?/span>
低電壓、持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)、多次脈沖、電壓衰減
幫助目標(biāo)分子(DNA或RNA等)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),且對(duì)細(xì)胞損傷小
四:反向?qū)肽J?/strong>
獨(dú)有設(shè)計(jì)!有效提高導(dǎo)入效率!
應(yīng)用范圍:
懸浮轉(zhuǎn)染
適用范圍:原代細(xì)胞、干細(xì)胞、以及各種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞(如神經(jīng)細(xì)胞、免疫 細(xì)胞及血液細(xì)胞等)
貼壁轉(zhuǎn)染
適用范圍:可以直接對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染,省去了細(xì)胞消化、再貼壁的步驟(對(duì)提高某些種類(lèi)細(xì)胞的存活率十分重要)!
離體組織轉(zhuǎn)染(Ex Vivo)
適用范圍:組織切片、腦切片、器官、胚胎等
活體轉(zhuǎn)染(In Vivo)
適用范圍:大腦、視網(wǎng)膜、角膜、肌肉、皮膚、肝臟、腎臟、睪丸、卵巢等部分參考文獻(xiàn):
細(xì)胞轉(zhuǎn)染儀(NEPA21、CUY21系列):
Barnabe-Heider et al.Genetic manipulation of adult mouse neurogenic niches by in vivo electroporation. Nature Methods, 2008 Feb;5(2):189-96.
Shibata MA, et al. Combination therapy with short interfering RNA vectors against VEGF-C and VEGF-A suppresses lymph node and lung metastasis in a mouse immunocompetent mammary cancer model. Cancer Gene Ther. 2008 Dec;15(12):776-86.
Limura T and Pourquie O. Collinear activation of Hoxb genes during gastrulation is linked to mesoderm cell ingression.Nature, 2006 Aug 3;442(7102):568-71.
Sanada K and Tsai LH. G Protein betagamma Subunits and AGS3 Control Spindle Orientation and Asymmetric Cell Fate of Cerebral Cortical Progenitors. Cell, 2005 Jul 15;122(1):119-31
Ladher RK et al. FGF8 initiates inner ear induction in chick and mouse. Genes and Development, 2005 Mar 1;19(5):603-13.
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