中國(guó)粉體網(wǎng)訊 近日，綠葉制藥集團(tuán)自主研發(fā)的創(chuàng)新制劑——瑞欣妥®（注射用利培酮微球（Ⅱ））獲國(guó)家藥品監(jiān)督管理局的上市批準(zhǔn)，正式在中國(guó)上市，將用于治療精神分裂癥以及其他各種精神病性狀態(tài)的癥狀，可減輕與精神分裂癥有關(guān)的情感癥狀。據(jù)悉，瑞欣妥®是注射用緩釋微球制劑，是全國(guó)首個(gè)自主研發(fā)、開(kāi)展全球注冊(cè)的、具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的創(chuàng)新微球制劑。
緩釋微球是指藥物溶解或分散在高分子材料基質(zhì)中形成的粒徑尺寸大小分布在 5～250 μm 之間的球狀實(shí)體。利用緩釋微球開(kāi)發(fā)新型的給藥系統(tǒng)逐漸成為科學(xué)界及工業(yè)界關(guān)注的焦點(diǎn)。理想的緩釋微球制劑的性質(zhì)由活性物質(zhì)、乳化技術(shù)以及聚合物材料三者共同決定。微球的制備關(guān)鍵在于不僅要保持藥物原有的活性，還需要藥物包封率高、微球粒徑均一、制備工藝重復(fù)性好。因此在制備微球時(shí)，不僅要非常了解藥物自身的理化性質(zhì)，還要非常熟悉常用輔料的性質(zhì)及乳化工藝技術(shù)。
(微球結(jié)構(gòu)圖，圖片來(lái)源：網(wǎng)絡(luò)）
1、緩釋微球制劑的材料選擇
目前微球制劑材料可大體分為兩類(lèi):天然來(lái)源的聚合物和人工化學(xué)合成的聚合物。天然來(lái)源的聚合物價(jià)格低廉且來(lái)源廣泛，可分為多糖和蛋白質(zhì)類(lèi)等，如葡聚糖、殼聚糖、海藻酸鹽、淀粉、明膠、白蛋白等。天然來(lái)源的聚合物對(duì)純化有著較高的要求，當(dāng)作為微球輔料用于大批量生產(chǎn)時(shí)較難保持批次間嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。常用的化學(xué)合成聚合物可分為聚酯、聚酸酐、聚磷腈、聚酰胺、聚磷酸酯等。其優(yōu)點(diǎn)是可以通過(guò)人為控制聚合制備工藝，來(lái)保證藥用輔料級(jí)別的質(zhì)量。當(dāng)作為載藥微球的骨架材料時(shí)，聚合物材料還可以通過(guò)改變黏度及分子量等參數(shù)，靈活地控制載藥微球的降解速度，以調(diào)節(jié)所包埋藥物的釋放速率。另外，對(duì)聚合物材料或微球表面進(jìn)行特異性修飾能使微球具有主動(dòng)靶向性，精準(zhǔn)定位到病灶區(qū)域或改變釋放行為。因此，化學(xué)合成的聚合物是微球研究及生產(chǎn)原料的主要來(lái)源。
2、微球的制備方法
微球的制備方法很多，常用的有乳化—溶劑揮發(fā)法、噴霧干燥法、相分離法、超臨界流體沉積法和熱熔擠出研磨法等，可根據(jù)藥物的性質(zhì)、制備微球的目的選擇合適的方法。
2.1乳化溶劑揮發(fā)法
使用 PLGA 作為載體制備微球，乳化—溶劑揮發(fā)方式是最常用的。乳化溶劑揮發(fā)法包括單乳法和復(fù)乳法，適用于親脂性藥物，用水包油（O/W）方法進(jìn)行制備，具體方法①根據(jù)藥物的物理性質(zhì)選擇相應(yīng)的 PLGA 修飾的末端基團(tuán)，②選擇合適分子量大小的 PLGA，③通過(guò)控制 PLGA 分子量，溶劑的濃度及第一相與第二相的比例及攪拌速率，控制制備的 PLGA 微球。
對(duì)于不溶于水或水溶性較差的藥物適用單乳法，具體方法是將藥物溶解或混懸于高分子溶液當(dāng)中，然后將得到的混合物分散在與其不相容的含有乳化劑的水相中，不斷攪拌，使溶劑揮發(fā)，得到固體微球。對(duì)于難溶于有機(jī)溶劑的水溶性藥物適用復(fù)乳法，具體的制備方法：（1）將藥物溶解于水中；（2）將 PLGA 溶于二氯甲烷等有機(jī)溶劑；（3）將兩者高速攪拌后得到初乳；（4）將初乳置于外水相中，得到復(fù)乳（即 W/O/W 水包油包水乳濁液）。
2.2噴霧干燥法
噴霧干燥法制備微球的過(guò)程是將液體原料噴霧到熱干燥介質(zhì)(空氣、或者氮?dú)?中，使其轉(zhuǎn)變成干粉的過(guò)程，大體可分為 3 個(gè)步驟：①通過(guò)霧化器將原料霧化成小液滴；②在與干燥氣體和顆粒形成接觸時(shí)將液滴干燥；③將干燥的顆粒從干燥介質(zhì)中分離出來(lái) 。過(guò)程中通過(guò)對(duì)干燥室進(jìn)出口溫度調(diào)整可以制備不同形態(tài)的微球。
噴霧干燥制備微球技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：①可用于制備多種藥物微球，特別是具有生物活性的蛋白和多肽類(lèi)藥物，在制備過(guò)程中，活性損失��；②制備過(guò)程中無(wú)外水相的藥物損失，可達(dá)到很高的包封率。缺點(diǎn)：①制得的微球可能黏附在噴霧干燥器的內(nèi)部，造成物料損失；②在制備過(guò)程中需要特別注意溫度控制，干燥溫度過(guò)高容易使微球變形、聚集，而干燥溫度過(guò)低時(shí)溶劑殘較多，對(duì)微球粒徑的控制較差。
噴霧干燥法因操作比較簡(jiǎn)單、包封率高、制得微球粒徑均勻、一步成球等特點(diǎn)，減少了人為操作的誤差，簡(jiǎn)化了過(guò)程中的滅菌工藝，適合于工業(yè)上大規(guī)模的放大生產(chǎn)，在微球生產(chǎn)制備中的應(yīng)用也越來(lái)越多。
2.3相分離法
相分離法應(yīng)用廣泛，可以將不同特性的藥物包埋進(jìn)微球。在載藥微球的制備中，應(yīng)用較為廣泛的是溶劑－非溶劑法，原理是在聚合物的有機(jī)溶液中加入第 3 組分來(lái)降低聚合物的溶解度，在一個(gè)特定的點(diǎn)，該工藝產(chǎn)生兩個(gè)液相(相分離)。在攪拌下向聚合物-藥物-溶劑體系中加入有機(jī)非溶劑，該有機(jī)非溶劑逐漸地萃取聚合物溶劑。結(jié)果使聚合物進(jìn)行相分離，形成非常軟的載藥液滴(可以用攪拌速率控制液滴粒徑)。然后將該系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到另一種有機(jī)非溶劑中，使微球固化以得到最終的微球產(chǎn)品。
相分離法制備微球優(yōu)點(diǎn)：①只需要標(biāo)準(zhǔn)設(shè)備并且易于分批次制備，不需要在設(shè)備上進(jìn)行昂貴的投資；②對(duì)于親水性藥物成球性好。缺點(diǎn)：①制備過(guò)程中使用大量有機(jī)溶劑，最終產(chǎn)品中有機(jī)溶劑的去除比較困難；②相分離制備的微球容易聚集成團(tuán)，大規(guī)模生產(chǎn)困難；③相比其他制備方法，微球在親脂性的硬化劑中固化，疏水性可能更強(qiáng)，需要特別關(guān)注分散劑的處方開(kāi)發(fā)；④無(wú)菌控制比較困難。
2.4超臨界流體沉積法
超臨界流體法是將藥物、聚合物和超臨界流體溶液混合均勻后，通過(guò)調(diào)整溫度和壓力使整個(gè)體系處于飽和狀態(tài)，再通過(guò)改變溫度和壓力等，降低整個(gè)體系的飽和度，從而使溶質(zhì)從整個(gè)體系中析出，實(shí)現(xiàn)聚合物對(duì)藥物的包裹，形成粒徑均一的微球。超臨界流體沉積法制備工藝條件溫和，微球形成時(shí)間短、包封率高、有機(jī)溶劑殘留量少，適合熱敏性藥物以及揮發(fā)性藥物微球的制備。
2.5熱熔擠出研磨法
熱熔擠出研磨法是將藥物同聚合物或其他輔料進(jìn)行熔融混合，得到均勻分布原料藥的 PLGA 條塊狀產(chǎn)品，再對(duì)此產(chǎn)品進(jìn)行研磨，得到顆粒狀微球�？赏ㄟ^(guò)控制熔融溫度和研磨條件來(lái)調(diào)整微球藥物分布狀態(tài)和粒徑大小。
熱熔擠出技術(shù)制備微球的優(yōu)點(diǎn)：①制備過(guò)程中不需要使用有機(jī)溶劑，不會(huì)帶來(lái)有機(jī)溶劑的問(wèn)題，安全無(wú)毒，質(zhì)量?jī)?yōu)良；②產(chǎn)率高，連續(xù)性強(qiáng)，包封率接近 100% 。缺點(diǎn)：①制備過(guò)程中有高溫過(guò)程，對(duì)溫度敏感的蛋白多肽類(lèi)藥物不能應(yīng)用此方法；②活性藥物成分(API)的質(zhì)量控制更嚴(yán)格，需要在制備前預(yù)處理，其直接影響微球的理化性質(zhì)甚至功效。
2.6微流控技術(shù)
微流控技術(shù)制備微球的方法是通過(guò)微通道生產(chǎn)液滴，利用體積(如注射器泵)或壓力(如壓力容器)的驅(qū)動(dòng)力將不相溶的連續(xù)相和分散相分別在各自的通道流動(dòng)，氣體或液體在通道的交匯處相遇，利用連續(xù)相對(duì)分散相進(jìn)行擠壓或剪切作用，促使界面不穩(wěn)定而斷裂，生成分散液滴。微通道可以制備的微球尺寸在10到300μm之間，制作精良的微通道內(nèi)部結(jié)構(gòu)規(guī)整，能夠保證液滴在每一條微通道內(nèi)的微環(huán)境完全相同，在擴(kuò)大生產(chǎn)規(guī)模時(shí)，只需要并行增加數(shù)量或者微反應(yīng)器單元，所有的工藝控制參數(shù)均具有延續(xù)性。并且通過(guò)不同參數(shù)輸入到預(yù)先設(shè)計(jì)的數(shù)學(xué)模型中，就可以實(shí)現(xiàn)對(duì)微球粒徑的預(yù)測(cè)，從而快速實(shí)現(xiàn)釋放行為的優(yōu)化。
微流控技術(shù)制備微球的優(yōu)點(diǎn)：①可控尺寸和形態(tài)：通過(guò)改變流速可以控制制備微球粒徑，變異系數(shù)(CV)可以控制到小于 2%。由于每個(gè)顆粒以相同的方式單獨(dú)形成，可以生成粒徑均一的微球。②具有生產(chǎn)多乳劑的能力，在各相通道內(nèi)通入多相互不相溶的溶液使其在微通道內(nèi)依次剪切并乳化，一層一層包覆從而形成分散的多重乳液；③在放大過(guò)程中具有高度的重現(xiàn)性。大規(guī)模并行化可以大批量生產(chǎn)，同時(shí)保持固定的產(chǎn)品特性；④乳化、聚合和分析的過(guò)程容易結(jié)合；⑤系統(tǒng)是封閉的，因此可以消除空氣/氧氣對(duì)藥物的降解，同時(shí)容易進(jìn)行無(wú)菌生產(chǎn)。缺點(diǎn)：①清洗比較困難；②生產(chǎn)效率還有待提高，以滿(mǎn)足工業(yè)化生產(chǎn)；③預(yù)測(cè)液滴直徑的模型較少。
2.7膜乳化法
根據(jù)膜乳化制備過(guò)程的成乳原理，膜乳化技術(shù)主要可分為兩大類(lèi)型：直接(常規(guī)) 膜乳化和快速膜乳化，兩種膜乳化方法在制備粒徑均一的乳液的過(guò)程各有優(yōu)勢(shì)，適用的乳滴粒徑控制范圍不同�？焖倌と榛鞯墓ぷ髟硎峭ㄟ^(guò)乳化法制備粒徑大于膜孔孔徑的預(yù)乳液，隨后利用外部壓力將預(yù)乳液快速通過(guò)尺寸大小可選擇的微孔膜，形成粒徑均一的乳滴；一般重復(fù)操作 3 ～ 5 次后，即可得到粒徑均一的乳液，乳液固化后即可得到粒徑均一可控的載藥微球。
膜乳化技術(shù)制備微球的優(yōu)點(diǎn)：①微球尺寸均一可控，微球粒徑取決于膜孔徑，微球制劑批次間重復(fù)性好；②反應(yīng)條件溫和，可以用于對(duì)攪拌敏感的蛋白多肽類(lèi)藥物；③乳液穩(wěn)定性好，制備過(guò)程中不易發(fā)生乳滴團(tuán)聚、破乳，乳化劑用量少；④操作過(guò)程簡(jiǎn)便，易于工業(yè)規(guī)模擴(kuò)大生產(chǎn)。缺點(diǎn)：①制備的微球粒徑過(guò)于單一，會(huì)影響藥物體內(nèi)釋放周期，并且有造成突釋的危險(xiǎn)，有待進(jìn)一步研究；②目前還沒(méi)有應(yīng)用膜乳化技術(shù)生產(chǎn)的微球產(chǎn)品上市，主要制約因素在于生產(chǎn)設(shè)備中膜材質(zhì)要符合多重要求：機(jī)械強(qiáng)度強(qiáng)、保持孔徑大小保持穩(wěn)定、易于清洗，不易堵塞。
3.微球制劑產(chǎn)品的質(zhì)量控制
通常評(píng)價(jià)微球的指標(biāo)有微球形態(tài)、粒徑及其分布、載藥量、包封率及其釋放度，有時(shí)還包括有關(guān)物質(zhì)和溶劑殘留等項(xiàng)目。
（圖片來(lái)源：李勛等：緩釋微球制劑的研究進(jìn)展）
3.1形態(tài)
通過(guò)掃描電子顯微鏡或者透射電子顯微鏡觀察微球的形態(tài)，如形狀(圓形或類(lèi)圓形)、表面形貌(光滑或粗糙)、骨架結(jié)構(gòu)(多孔或?qū)嵭?。微球形態(tài)與結(jié)構(gòu)的不同對(duì)微球的載藥量以及釋放行為有顯著影響。表面粗糙的微球易吸附藥物結(jié)晶，往往會(huì)導(dǎo)致高突釋。通過(guò)對(duì)微球形態(tài)進(jìn)行觀測(cè)，總結(jié)形態(tài)與處方工藝之間的關(guān)系，不但可以對(duì)微球的制備機(jī)理進(jìn)行探索，還可以對(duì)釋放行為進(jìn)行優(yōu)化。
3.2粒徑及分布
影響微球產(chǎn)品的釋放度的關(guān)鍵因素主要是粒徑和粒徑的分布。粒徑測(cè)定方法有很多種，主要包括動(dòng)態(tài)光散射法（DLS）、激光衍射法（LLD）、透射電鏡（TEM）及掃描電鏡（SEM）、原子力學(xué)顯微鏡（AFM）等。其測(cè)量方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，DLS 法可準(zhǔn)確測(cè)量的粒徑范圍較窄，LLD 法測(cè)量粒徑范圍為1～1000μm，但其需要的樣品量大，而TEM、SEM易受樣品制備過(guò)程影響，AFM 則設(shè)備較復(fù)雜。綜上所述，激光衍射法仍是最常用的測(cè)量粒徑及粒徑分布的方法。
3.3載藥量/包封率
載藥量是指微球制劑中所含藥物的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，而包封率是指微球制劑中包封的藥量占微球制劑中包封與未包封總藥量的比值，二者是衡量制備工藝和成本的重要指標(biāo)。其檢測(cè)方法一般是先采用合適的有機(jī)溶劑將微球高分子材料骨架溶解，再根據(jù)藥物的性質(zhì)選擇不同的方法將藥物分離或提取出來(lái)，進(jìn)行含量測(cè)定。
3.4釋放度
選擇合適的高分子聚合物材料與工藝制備不同結(jié)構(gòu)的載藥微球，使活性成分按照預(yù)期的藥代動(dòng)力學(xué)模型釋放。對(duì)于可生物降解材料，溶脹和溶蝕機(jī)制也是控制藥物釋放的主要因素。釋放介質(zhì)的組成、pH 值、離子強(qiáng)度、滲透壓和溫度等都會(huì)對(duì)釋放速率產(chǎn)生影響。在載藥微球的研發(fā)階段，應(yīng)確定好合適的體外釋放條件，并根據(jù)體內(nèi)釋放條件建立體內(nèi)、體外相關(guān)性。
3.5高分子聚合物的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度與晶型改變
在高分子聚合物材料析出形成微球后，聚合物的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(T g )會(huì)發(fā)生改變。當(dāng)聚合物和藥物或溶劑共同存在時(shí)，易產(chǎn)生共價(jià)鍵吸引力，使得聚合物的 Tg降低。比較常用的 Tg 檢測(cè)方法是差示熱分析法和差示掃描量熱法。高分子聚合物的晶型與結(jié)晶度的變化可以從側(cè)面反映藥物的釋放速率和微球的降解速度。
3.6有機(jī)溶劑殘留
制備過(guò)程中引入的油相（有機(jī)溶劑）在固化的過(guò)程中會(huì)存在未能完全除去的問(wèn)題，諸如丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷等的殘留不僅影響微球儲(chǔ)存的穩(wěn)定性，還會(huì)在注射后引起人體的副作用，因此每個(gè)國(guó)家的藥典都對(duì)微球的有機(jī)溶劑殘留量有著嚴(yán)格的要求。不同的有機(jī)溶劑毒性不同，限度也有所不同，目前常規(guī)使用氣相色譜法進(jìn)行殘留有機(jī)溶劑的檢測(cè)。
另外，通過(guò)材料降解實(shí)驗(yàn)考察分子量，緩釋微球的微生物檢查等也是微球藥物質(zhì)量評(píng)價(jià)的指標(biāo)。
小結(jié)：
注射用瑞欣妥的上市，意味著我國(guó)已掌握新型高端制劑的代表之一-微球制劑的關(guān)鍵工藝，隨著時(shí)代的進(jìn)步，對(duì)微球制劑生產(chǎn)設(shè)備及產(chǎn)品的的要求會(huì)越來(lái)越高，生產(chǎn)效率高、污染少、控制簡(jiǎn)單的設(shè)備亟待開(kāi)發(fā)。制備粒徑可調(diào)整性更強(qiáng)、物理穩(wěn)定性更好的微球制劑，且可大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)可能是微球制劑技術(shù)今后發(fā)展方向之一。
參考文獻(xiàn)
李勛等：緩釋微球制劑的研究進(jìn)展
陳曉慧等：微球制劑的研究進(jìn)展
王玉靜等：微球制劑的研究進(jìn)展及前景分析
孫麗鵬等：微球制劑的研究應(yīng)用進(jìn)展
韓寧娟等：在藥劑學(xué)中微球制劑制備方法研究
李想等：長(zhǎng)效微球制劑產(chǎn)業(yè)化研究進(jìn)展
（中國(guó)粉體網(wǎng)編輯整理/青黎）
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