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外囊泡的來(lái)源廣泛，細(xì)菌外囊泡（BEV）同樣也會(huì)影響各種細(xì)胞行為，包括遺傳信息的傳輸、噬菌體感染、代謝介導(dǎo)以及細(xì)菌-細(xì)菌和細(xì)菌-宿主之間的相互作用。為了方便大家更全面的認(rèn)識(shí)BEV在生物治療開發(fā)中的研究現(xiàn)狀，我們希望通過(guò)這篇綜述來(lái)系統(tǒng)地向大家進(jìn)行介紹。

PART/01  作為基因治療的遞送載體

A. 靶向骨的BEVs-hCXCR4-SOST iRNA（BEV-CSs）治療骨質(zhì)疏松癥的示意圖。

B. siRNA@M-/PTX-CA-OMV調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞代謝和抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的示意圖。

C. OMVtRNA - pre-miR-126 對(duì)抗乳腺癌的示意圖。

D.BEV遞送的DNA質(zhì)粒作為疫苗的示意圖。

E. BEV遞送了CRISPR-Cas 9，用于樹突狀細(xì)胞靶向基因編輯。

PART/ 02  用于遞送治療性分子

A. OMV@PGZ 搭載在中性粒細(xì)胞的便車上進(jìn)入大腦后，用于增強(qiáng)缺血性中風(fēng)治療效果的示意圖。

B. BEV 遞送化療藥物阿霉素用于癌癥治療的示意圖。

C. BEV負(fù)載左氧氟沙星對(duì)抗抗生素耐藥細(xì)菌的示意圖。

D. 加載利福平的介孔二氧化硅顆粒，被革蘭氏陰性大腸桿菌的BEV包被，以克服革蘭氏陰性菌原本的耐藥性。

E. BEV 遞送的過(guò)氧化氫酶緩解腫瘤缺氧并增強(qiáng)放療效果的示意圖。

PART/ 03  用于遞送聯(lián)合治療的功能性制劑

A. 融合黑色素瘤細(xì)胞膜囊泡（CMV）和沙門氏菌衍生的外膜囊泡（OMV）的外囊泡封裝 PLGA - 吲哚菁綠（PI@EPV）以增強(qiáng)協(xié)同抗腫瘤作用的示意圖。

B. OMV 包被的聚多巴胺納米顆粒（MOD@DMV）增強(qiáng)抗瘤光熱免疫治療的構(gòu)建路線方案。

C. MOD@DMV形態(tài)的TEM圖像和光熱性能的表征。

D.靶向仿生遞送平臺(tái)（ZnBq/Ce6@ZIF-8@OMV）的圖示，大腸桿菌的 OMV在基因改造后，靶向?qū)︴U曼不動(dòng)桿菌的特異性識(shí)別，用于運(yùn)輸金屬抗生素對(duì)抗多重耐藥細(xì)菌。

E. ZnBq / Ce6@ZIF-8@OMV在體內(nèi)發(fā)揮抗菌作用，消除腦組織中的細(xì)菌并促進(jìn)感染小鼠的存活。

F. 生物礦化大腸桿菌衍生的外膜囊泡，以減輕過(guò)度反應(yīng)的炎癥反應(yīng)和肝損傷，包裹溶瘤腺病毒以介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞自噬，用于系統(tǒng)免疫治療。

PART/ 04 作為納米疫苗

01/ 抗細(xì)菌感染疫苗

A. 含有 SaoA-LPP的BEV納米疫苗可保護(hù)小鼠免受豬鏈球菌感染。 

B. 富含T3SS-3和T6SS-1（M9-OMV）的基于BEV的疫苗可保護(hù)小鼠免受毒性性類鼻疽芽孢桿菌的侵害，且對(duì)活細(xì)胞沒有毒性。

C. ΔompAΔompCΔompD BEV納米廣譜疫苗保護(hù)小鼠免受所有沙門氏菌菌株和APEC O78的侵害。

D. 雜交納米疫苗（Ab-NP）表現(xiàn)出高度的尺寸均勻性和更強(qiáng)的免疫反應(yīng)。

E. BEV與肺泡巨噬細(xì)胞膜雜交以提高生物相容性和調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)，降低免疫過(guò)度刺激、過(guò)度炎癥或?qū)λ拗鹘M織造成損傷。

02/ 抗病毒感染疫苗

A. 將外露SARS-CoV-2刺突蛋白的細(xì)胞膜囊泡與鼠傷寒沙門氏菌的BEV雜交，形成病毒模擬雜交膜衍生囊泡（HMV），BEV作為佐劑來(lái)增強(qiáng)免疫反應(yīng)。 

B. 在BEV上改進(jìn)LPS可保護(hù)小鼠免受不同血清型的流感病毒感染。 

C. 將HIV-1包膜近端外部區(qū)域（MPER）與外膜蛋白OmpF摻入BEV納米疫苗上可誘導(dǎo)抗HIV 1-抗體的產(chǎn)生。

D. 基于BEV的疫苗誘導(dǎo)針對(duì) 8 種血清型HPV的L2特異性IgG滴度。

E. 負(fù)載HPV E7的BEV疫苗表現(xiàn)出抗腫瘤功效，表明該疫苗對(duì)HPV陽(yáng)性或?qū)m頸癌患者具有潛在的治療價(jià)值。 

F. 表達(dá)融合HCV蛋白的BEV納米疫苗在小鼠中誘導(dǎo)IgG-1，表明BEV具有卓越佐劑特性及其作為未來(lái)HCV疫苗開發(fā)平臺(tái)的潛力。

03/ 抗腫瘤疫苗

A. 基于OMV的疫苗示意圖: 通過(guò)在ClyA上融合多種蛋白質(zhì)捕獲器 （Spycatcher 和 Snoopcatcher）進(jìn)行多功能抗原展示，實(shí)驗(yàn)表明其在 MC38腫瘤模型中具有潛在的抗腫瘤免疫力。

B. 基于OMV的mRNA遞送系統(tǒng)方案：通過(guò)在OMV表面融合RNA結(jié)合蛋白 L7Ae和內(nèi)體逃逸促進(jìn)蛋白LLO 。

C. 基于OMV的mRNA遞送系統(tǒng)的轉(zhuǎn)移抑制效果，對(duì)體內(nèi)的抗腫瘤療效和長(zhǎng)期免疫記憶的影響。

D. 通過(guò)膜融合嗜粘蛋白阿克曼菌的外膜囊泡和腫瘤衍生外泌體制備 Lipo@HEV的示意圖，輔以表達(dá)PD-L1的質(zhì)粒，用于協(xié)同癌癥免疫治療。

E.制備和生物礦化OMV疫苗（OMV-SIRPα@CaP/GM-CSF）以增強(qiáng)血液中的安全循環(huán)，刺激訓(xùn)練免疫力以進(jìn)行不同的腫瘤消退。

BEV的優(yōu)勢(shì)

1.與哺乳動(dòng)物細(xì)胞來(lái)源的細(xì)胞外囊泡（MEV）相比，BEV具有一些顯著的特點(diǎn)：

更易生產(chǎn)、產(chǎn)量更高，且成本更低。作為細(xì)菌的衍生物，其倍增時(shí)間短，可以進(jìn)行高密度的液體培養(yǎng)，只需依賴于廉價(jià)且容易獲得的液體培養(yǎng)基，從而降低了成本益。

2. 高度穩(wěn)定，并且對(duì)蛋白酶和核酸酶等多種酶活性具有抵抗力這一特性，適合用于對(duì)溫度和酶活性敏感的生物分子貨物，同時(shí)允許在高溫下長(zhǎng)期儲(chǔ)存生物分子。而無(wú)需長(zhǎng)時(shí)間昂貴的物流過(guò)程（如冷凍儲(chǔ)存）。

3. 穿透能力更強(qiáng)，能夠穿透生物組織屏障，如上皮細(xì)胞層，靶向骨骼結(jié)構(gòu)，甚至繞過(guò)血腦屏障（BBB），同時(shí)BEVs具有MEV不具備的對(duì)親本細(xì)菌的親和力。

貝克曼庫(kù)爾特生命科學(xué)細(xì)菌外囊泡純化方案

參考文獻(xiàn)：

1. Bacteria extracellular vesicle as nanopharmaceuticals for versatile biomedical potential2.Bacterial extracellular vesicles as bioactive nanocarriers for drug delivery: Advances and perspectives