編號：SBJS00622
篇名：基于酶輔助循環(huán)放大和銀納米簇技術(shù)構(gòu)建熒光傳感器用于MicroRNA的檢測
作者：劉景榮[1] ;潘云苓[1] ;趙燕蘋[2] ;陳梅[2] ;夏垚坤[2] ;蘭建明[2] ;韓志鐘[2] ;吳芳[2] ;陳敬華[2] ;李春艷[2]
關(guān)鍵詞：磁珠 雙鏈特異性核酸酶 銀納米簇 MIR-21 熒光生物傳感器
機(jī)構(gòu)： [1]福州市第一醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合腫瘤科,福建福州350009; [2]福建醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院,福建福州350108
摘要： 基于雙鏈特異性核酸酶（Duplex-specific nuclease,DSN）選擇性切割DNA單鏈和DNA保護(hù)的銀納米簇的特性,建立了一種新型的熒光傳感器用于MicroRNA（MiR-21）的高靈敏檢測。當(dāng)MiR-21存在時,與Cp雜交形成DNA/RNA雙鏈結(jié)構(gòu),此時在DSN的水解下,釋放出探針DNA部分片段和完整的MiR-21。釋放出來的MiR-21可再次發(fā)生與Cp雜交、DSN酶切等反應(yīng),如此反復(fù),可實現(xiàn)一條MiR-21分子與多條探針雜交、酶切的循環(huán)過程。經(jīng)磁分離,上清液中的探針DNA部分片段與Ag＋結(jié)合并在硼氫化鈉（Na BH4）的還原下產(chǎn)生銀簇,檢測到較強(qiáng)的熒光信號。相反,當(dāng)MiR-21不存在時,DSN對單鏈探針無酶切作用,不能水解Cp,經(jīng)磁分離,上清液中檢測不到熒光信號。在最佳條件下,該傳感器檢測MiR-21的線性范圍為50 fmol/L~10 pmol/L,檢測限達(dá)6 fmol/L,而且具有較好的選擇性,有望用于臨床實際樣本中微量MiR-21的檢測。
