編號(hào)：CPJS05202
篇名：磁性納米顆粒Fe_3O_4@SiO_2的制備及在全血DNA提取中的應(yīng)用
作者：王念躍[1] ;馬超[2,3] ;李傳燕[2] ;王芳[2]
關(guān)鍵詞：磁性納米顆粒 制備 乙肝病毒 核酸提取 PCR擴(kuò)增
機(jī)構(gòu)： [1]東南大學(xué)附屬第二醫(yī)院檢驗(yàn)科,南京210003; [2]東南大學(xué)生物電子學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,南京210096; [3]徐州醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)信息學(xué)院,江蘇徐州221004
摘要： 目的自制Fe_3O_4@SiO_2磁性納米顆粒并評(píng)價(jià)在全血樣本中DNA提取效果,進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)磁珠法檢測(cè)HBV DNA的技術(shù)。方法采用溶劑熱法自制Fe_3O_4磁性納米顆粒,并用表面化學(xué)修飾法制備Fe3O4@SiO_2磁性復(fù)合顆粒;利用該顆粒經(jīng)吸附、洗滌、洗脫等步驟提取全血樣本中DNA,并通過(guò)電泳、PCR擴(kuò)增等傳統(tǒng)技術(shù)檢測(cè)DNA提取效果,與煮沸法提取血清DNA樣本的效果進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果成功制備出直徑約550 nm的Fe_3O_4@SiO_2磁性納米顆粒,該顆粒分散均勻;自制的磁性納米顆粒可用于全血DNA提取與純化,實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)便。自制磁性納米顆粒提取全血DNA濃度為150.56 ng/μL,純度為1.53;該提取方法與傳統(tǒng)煮沸裂解法對(duì)96份樣本進(jìn)行對(duì)照研究,證實(shí)其靈敏度有較大提高。結(jié)論利用自制的Fe_3O_4@SiO_2磁性納米顆粒和合適的緩沖液體系,可成功地提取純度較高的DNA,通過(guò)PCR擴(kuò)增及對(duì)比實(shí)驗(yàn)表明,該磁性納米顆粒及其提取工藝經(jīng)優(yōu)化后,可用于傳染病的體外分子診斷研究。
