編號：NMJS06250
篇名：納米孔技術(shù)檢測蛋白質(zhì)的研究新突破
作者：張獻[1]
關(guān)鍵詞：實驗研究 信號檢測 BSA 固態(tài)納米孔
機構(gòu)： [1]廣西中醫(yī)藥大學(xué),廣西南寧530000
摘要： 目的探討納米孔技術(shù)檢測蛋白質(zhì)的研究新突破。方法應(yīng)用氮化硅材料納米孔芯片，初步研究金納米棒及BSA易位行為，建立應(yīng)用納米孔檢測納米顆粒樣品及蛋白質(zhì)生物分子樣品方法，統(tǒng)計分析納米顆粒的易位信號及蛋白質(zhì)分子信號;按照實驗所獲得的易位信號，總結(jié)常見的易位信號類型;按照實驗結(jié)果模擬固態(tài)納米孔內(nèi)電場及納米孔周圍電場，獲得不同電壓下同一納米孔的電場強度比較。結(jié)果實驗選擇孔徑為78nm的固態(tài)納米孔檢測蛋白質(zhì)BSA，將溶于1MKC1溶液內(nèi)的樣品，加人至流體內(nèi)，偏置電壓變換獲得BSA分子過孔信號圖；選擇76nm的納米孔在980mV、900mV、400mV電壓下檢測12nm的蛋白質(zhì)BSA分析易位結(jié)果，易位事件的原始信號如圖2曰400mV電壓下納米孔與蛋白質(zhì)的相互作用較強，易位事件相對較為分散，而980mV及900mV電壓下，納米孔與蛋白質(zhì)分子的作用時間較短，分子過孔速度較快，出現(xiàn)的易位事件也較多;激發(fā)波長為280nm時，BSA在自然折疊態(tài)時內(nèi)源熒光發(fā)射峰的最大發(fā)射波長位于346nm附近，說明色氨酸殘基部分被隱藏；隨著尿素濃度的升高，BSA的相對熒光強度逐漸下降，出現(xiàn)熒光猝滅現(xiàn)象，說明BSA及尿素發(fā)生作用，導(dǎo)致BSA變性，但在0?5M時，蛋白質(zhì)出現(xiàn)部分變性，6M后，峰值出現(xiàn)顯著紅移，BSA完全變性;蛋白質(zhì)BSA和經(jīng)尿素變性后的BSA易位原始信號圖：BSA加人后，電流基線較波動，后出現(xiàn)易位信號，蛋白質(zhì)易位時間的長短，與BSA與孔的作用及蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)密切相關(guān);加人經(jīng)尿素變性的BSA后，電流基線總體穩(wěn)定但變細，易位信號峰頂端較尖。結(jié)論氮化硅納米孔檢測蛋白質(zhì)應(yīng)用為后續(xù)的納米孔傳感器在蛋白質(zhì)研究中提供理論及實驗基礎(chǔ)。
