編號:NMJS06911
篇名:磁性納米顆粒固定化乙醇脫氫酶的研究
作者:余帶兵 李紅梅 高露姣 孫十凡 周福歡
關鍵詞: 磁性納米顆粒 表面修飾 乙醇脫氫酶 固定化
機構: 上海理工大學醫(yī)療器械與食品學院 東海水產(chǎn)研究所
摘要: 本研究采用3-丙氨基三乙氧基硅烷(APTES)和戊二醛修飾包裹有SiO2磁性Fe3O4納米顆粒表面,將其作為固定化載體固定化乙醇脫氫酶,研究固定化條件對固定化效率的影響,并對固定化酶性質(zhì)進行分析。研究發(fā)現(xiàn),當Fe3O4@SiO2納米顆粒修飾上氨基和醛基后依然具有良好的水分散性和膠體穩(wěn)定性,適合作為固定化載體。通過單因素優(yōu)化,發(fā)現(xiàn)當最適給酶量為11.3U/100mg,攪拌轉速為150r/min,固定化pH和固定化溫度分別控制在6.5和5℃~15℃,固定化時長為45min時,具有較好的固定化效果,固定化率可達到60.2%。在此條件下制備得到的固定化酶與游離酶相比,固定化酶具有良好的耐高溫和耐堿性。所得固定化乙醇脫氫酶在連續(xù)使用8次后,固定化率仍保留在57%左右,表明該固定化酶具有較好的操作穩(wěn)定性,可為連續(xù)生產(chǎn)NADH提供技術依據(jù)。