編號:CPJS06830
篇名:氧化石墨烯基質毛細管電色譜胰蛋白酶微反應器的性能研究
作者:劉佳 董旭 郭華 王嫚 申剛義
關鍵詞: 酶微反應器 氧化石墨烯 毛細管電色譜 胰蛋白酶 抑制劑
機構: 中央民族大學藥學院
摘要: 基于石墨烯優(yōu)良的物化性能,利用層層組裝法將氧化石墨烯修飾于石英毛細管內壁,制備了氧化石墨烯基質的毛細管電色譜,通過電滲流、拉曼光譜等對其進行表征。在此基礎上,基于離子鍵合法將胰蛋白酶固定于毛細管電色譜柱頭,制備胰蛋白酶微反應器。兩者結合構成毛細管電色譜胰蛋白酶微反應器。實驗結果顯示,氧化石墨烯作為基質既可提高樣品的分離效率,還能促進胰蛋白酶的催化性能。氧化石墨烯修飾的毛細管電色譜對N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯鹽酸鹽(BAEE)和N-苯甲酰-L-精氨酸(BA)混合物的分離度從裸毛細管的3.70提升至4.71,而其固定化酶活性(米氏常數Km=1.10mmol/L,最大反應速率Vmax=0.32mmol·L^-1·s^-1)也明顯優(yōu)于裸毛細管(Km=109.77mmol/L,Vmax=0.00046mmol·L^-1·s^-1)。利用所制備的微反應器從10種中藥材中篩選胰蛋白酶抑制劑活性成分的藥材,結果發(fā)現三七和大黃中均存在胰蛋白酶抑制劑活性成分。