編號(hào)：NMJS09067
篇名：基于高通量測(cè)序技術(shù)的9種鐵線蓮屬藥材混合粉末分子鑒定
作者：呼和 莫日根 烏雅漢 烏日汗 額爾敦呼 白明君 包桂花 許亮
關(guān)鍵詞： 高通量測(cè)序技術(shù) ITS2 鐵線蓮屬 藥材 混合粉末 分子鑒定
機(jī)構(gòu)： 內(nèi)蒙古民族大學(xué) 新巴爾虎右旗阿拉坦額莫勒鎮(zhèn)社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心 內(nèi)蒙古自治區(qū)國(guó)際蒙醫(yī)醫(yī)院 蒙醫(yī)藥研發(fā)工程教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
摘要： 目的建立基于高通量測(cè)序技術(shù)的9種鐵線蓮屬混合粉末分子鑒定方法。方法采用高通量測(cè)序技術(shù),對(duì)9種鐵線蓮屬藥材混合粉末樣品中的總DNA經(jīng)提取,對(duì)ITS2片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增,利用Illumina MiSeq平臺(tái)對(duì)DNA片段進(jìn)行雙端測(cè)序,最后采用FLASH、QIIME、GraPhlAn及MEGA 7.0軟件對(duì)序列進(jìn)行整理并聚類(lèi)分析,鑒定混合粉末中的物種。結(jié)果混合粉末樣品中得到高質(zhì)量的ITS2序列共496條,鐵線蓮屬物種含有序列72條,比對(duì)出棉團(tuán)鐵線蓮、女萎鐵線蓮、短尾鐵線蓮、灌木鐵線蓮、單葉鐵線蓮、黃花鐵線蓮、粗齒鐵線蓮等7個(gè)物種,未能比對(duì)出東北鐵線蓮和芹葉鐵線蓮。結(jié)論以ITS2作為DNA條形碼,采用高通量測(cè)序技術(shù),可以鑒定出鐵線蓮屬藥材混合樣品中的7個(gè)物種,為混合藥材的鑒定提供依據(jù)。
