編號：FTJS10610
篇名：微流控法制備載卵母細(xì)胞水凝膠微球及其玻璃化保存
作者：張慧 張宇琪 胡劍麟 周新麗
關(guān)鍵詞： 微流控 卵母細(xì)胞 微囊化 玻璃化保存 低溫保護(hù)劑
機(jī)構(gòu)： 上海理工大學(xué)健康科學(xué)與工程學(xué)院生物系統(tǒng)熱科學(xué)研究所 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一人民醫(yī)院輔助生殖醫(yī)學(xué)科
摘要： 目的通過微流控法制備載卵母細(xì)胞海藻酸鈉微球,在低濃度保護(hù)劑下實(shí)現(xiàn)卵母細(xì)胞玻璃化保存。方法采用流動聚焦型微流控芯片,通過調(diào)整芯片結(jié)構(gòu)、海藻酸鈉溶液濃度和流速比,制備大小均勻、空包率低、低溫耐受的載卵母細(xì)胞海藻酸鈉水凝膠微球。在低濃度低溫保護(hù)劑下將微球玻璃化保存,復(fù)溫后檢測存活率,采用細(xì)胞松弛素B和氯化鍶孤雌激活卵母細(xì)胞,與Cryotop玻璃化法對比卵母細(xì)胞存活率和卵裂率、囊胚率。結(jié)果制備的海藻酸鈉微球在冷凍復(fù)溫前后的體積穩(wěn)定且結(jié)構(gòu)完整,在將卵母細(xì)胞包封在海藻酸鈉水凝膠中后,空包率低,存活率、卵裂率和囊胚率與新鮮組相比無顯著差異。在低濃度低溫保護(hù)劑10%DMSO+10%乙二醇(EG)+0.5 mol/L海藻糖中玻璃化凍存后卵母細(xì)胞的存活率達(dá)到92.48%,卵裂率70.80%,囊胚率20.42%,與高濃度保護(hù)劑15%DMSO+15%EG+0.5 mol/L海藻糖中Cryotop玻璃化法相比無顯著性差異。結(jié)論本文設(shè)計(jì)制作了三通道內(nèi)部交聯(lián)芯片并用于卵母細(xì)胞玻璃化保存的微流控系統(tǒng),可生成大小均勻、空包率低、低溫耐受的載卵母細(xì)胞海藻酸鈉水凝膠微球,在低濃度保護(hù)劑下實(shí)現(xiàn)玻璃化保存,為卵母細(xì)胞玻璃化保存方法提供新思路。
