編號(hào)：NMJS01225
篇名：mPEG-CS納米粒介導(dǎo)livinshRNA基因納米復(fù)合物的制備及轉(zhuǎn)染效率
作者：肖維; 彭健; 張陽(yáng)德;
關(guān)鍵詞：mPEG-CS納米粒; Livin shRNA; 大腸癌; 轉(zhuǎn)染效率; 基因;
機(jī)構(gòu)： 中南大學(xué)衛(wèi)生部肝膽腸外科研究中心;
摘要： 背景:作為非病毒基因轉(zhuǎn)染載體,由可降解的高聚物形成的納米載體目前被廣泛由于基因轉(zhuǎn)染,因?yàn)樗麄兙哂辛己玫木忈屝?靶向性和生物相容性。目的:制備mPEG-CS納米粒,探討mPEG-CS作為L(zhǎng)ivin shRNA基因轉(zhuǎn)染載體的可行性。方法:通過(guò)離子交聯(lián)法制備mPEG-CS納米粒,利用聚乙二醇對(duì)殼聚糖進(jìn)行改性,通過(guò)靜電吸附法制備載livin shRNA的基因納米復(fù)合物。Zeta-size分析儀和透射電鏡檢測(cè)空白納米粒和載livin shRNA的基因納米復(fù)合物的形態(tài)、粒徑和zeta電位,測(cè)定基因納米復(fù)合物的包封率,凝膠電泳阻滯實(shí)驗(yàn)和DNase I酶消化實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證納米粒對(duì)基因的保護(hù)作用。利用最佳條件下制備的基因納米復(fù)合物,轉(zhuǎn)染大腸癌HT-29細(xì)胞,考察轉(zhuǎn)染效率。結(jié)果及結(jié)論:成功制備出約60nm的mPEG-CS納米粒,當(dāng)納米粒與基因體積比為3∶1時(shí),得到的基因納米復(fù)合物形較規(guī)則,粒徑100nm左右;其包封率為(94.32±0.35)%。凝膠電泳阻滯實(shí)驗(yàn)表明納米粒能夠緊密結(jié)合DNA,對(duì)基因具有良好的基因保護(hù)作用。該基因納米復(fù)合物轉(zhuǎn)染大腸癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率高,持續(xù)作用時(shí)間長(zhǎng)。mPEG-CS納米粒作為基因轉(zhuǎn)染載體,對(duì)基因具有保護(hù)作用...
