編號(hào)：NMJS01544
篇名：殼聚糖納米纖維支架對(duì)豬肝細(xì)胞分泌豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒的影響
作者：韓冰； 施曉雷； 肖江強(qiáng)； 張悅； 褚薛慧； 顧勁揚(yáng)； 顧忠澤； 丁義濤；
關(guān)鍵詞：殼聚糖納米纖維支架； 豬肝細(xì)胞； 豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒； 生物人工肝；
機(jī)構(gòu)： 南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院肝膽外科； 南京醫(yī)科大學(xué)鼓樓臨床學(xué)院肝膽外科； 東南大學(xué)生物電子學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室；
摘要： 探討殼聚糖納米纖維支架對(duì)肝細(xì)胞的PERV分泌量以及其感染性的影響。將新鮮分離的豬肝細(xì)胞接種于殼聚糖納米纖維支架或普通條件下連續(xù)培養(yǎng)7 d,分為實(shí)驗(yàn)組(Nano組)和對(duì)照組(Hep組)。每天收集培養(yǎng)液檢測(cè)逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)活性,并通過(guò)RT-PCR和實(shí)時(shí)定量PCR測(cè)定PERV RNA水平。通過(guò)western blot檢測(cè)細(xì)胞裂解液中PERV gag 30蛋白含量。細(xì)胞培養(yǎng)液體外孵育HEK293細(xì)胞以測(cè)定其感染性。結(jié)果表明:實(shí)時(shí)定量PCR、RT活性以及western blot具有相似的變化趨勢(shì)。在體外培養(yǎng)10 h和2 d出現(xiàn)PERV分泌高峰然后逐漸下降。除第6 dPERV RNA水平和第5 d蛋白水平實(shí)驗(yàn)組明顯高于對(duì)照組外,其余均無(wú)明顯差異。體外感染實(shí)驗(yàn)無(wú)HEK293細(xì)胞感染。殼聚糖納米纖維支架會(huì)延長(zhǎng)豬肝細(xì)胞的PERV分泌時(shí)間但對(duì)分泌量以及體外感染性并無(wú)明顯影響,可安全用于生物人工肝。
