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猴痘病毒與超離純化

猴痘病毒與超離純化
貝克曼庫爾特生命科學(xué)  2024-08-30  |  閱讀:606

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鑒于剛果民主共和國和越來越多的非洲國家出現(xiàn)猴痘病例激增現(xiàn)狀。世界衛(wèi)生組織8月14日宣布,猴痘疫情構(gòu)成“國際關(guān)注的突發(fā)公共衛(wèi)生事件”(上一次是新冠)。


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猴痘的主要傳播途徑和癥狀1


從2022年起,在我國多個省份也先后報告多例猴痘病例。2023年7月26日,國家衛(wèi)健委發(fā)布《猴痘防控方案》。讓我們一起來解讀一下該方案中一些我們關(guān)心的重點問題:


Q 什么是猴痘病毒?

A 與天花病毒同屬正痘病毒屬。1958年在猴子中發(fā)現(xiàn)該病毒。1970年首例確診人類病例。


Q 猴痘的傳染源是什么?

A 目前認(rèn)為非洲嚙齒類動物可能為其自然宿主。傳染源包括猴痘病例及感染的嚙齒類動物、猴和猿等靈長類動物。


Q 猴痘病毒傳播途徑?

A 主要通過直接接觸病變皮膚或黏膜傳播,亦可通過被病毒污染的物品和飛沫傳播,接觸感染動物的呼吸道分泌物、病變滲出物、血液及其它體液,或被感染動物咬傷、抓傷感染傳播。


Q 臨床癥狀有哪些?

A 通常包括皮疹和黏膜疹,常見癥狀包括發(fā)熱、頭痛、背痛、肌痛、淋巴結(jié)腫大等。


Q 病程及嚴(yán)重程度?

A 猴痘為自限性疾病,一般病程約2—4周,大多數(shù)病例癥狀會自行消失,重癥和死亡主要為兒童、孕婦和免疫力低下人群,死率約為0.1%。


實驗室如何分離猴痘病毒?

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猴痘病毒電鏡圖片


早在2022年9月報告了首例從中國大陸輸入的猴痘(MPX)病例時。中國疾病預(yù)防控制中心就成功使用超速離心分離和富集了培養(yǎng)后的猴痘病毒2。


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密度梯度離心精純猴痘病毒顆粒示意圖


如果只是簡單的富集病毒,那么常規(guī)的超速差速離心沉淀就可以2。如果要獲得高質(zhì)量的病毒樣品進(jìn)行后續(xù)研究,那么可以考慮加一步蔗糖密度梯度離心3,4。這里推薦水平轉(zhuǎn)子(例如SW 41、SW 32)來進(jìn)行離心,保證獲得更好的病毒條帶。


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離心過程中的潛在安全風(fēng)險


由于猴痘等病毒的純化往往具有極大的生物安全隱患。因此需要對于離心過程進(jìn)行嚴(yán)格控制。Beckman Optima系列超速離心機(jī)提供從主機(jī)——轉(zhuǎn)子——耗材全流程的離心生物安全解決方案。


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耗材

一次性快封管,通過無線熱封器可以達(dá)到完全密封,避免樣品漏出。


轉(zhuǎn)子

轉(zhuǎn)子蓋在真空中形成密封,防止泄漏,可以不開蓋的情況下,整體的移動轉(zhuǎn)子,在安全處再打開,轉(zhuǎn)子也可整體滅菌處理。


主機(jī)

兩組HEPA過濾器分別置于空氣流入口和流出口,高效去除氣溶膠中的病毒顆粒,超速離心時防止氣溶膠外溢。


參考文獻(xiàn):1. Monkeypox virus (MPXV): A Brief account of global spread, epidemiology, virology, clinical features, pathogenesis, and therapeutic interventions. 20232. Isolation and Characterization of Monkeypox Virus from the First Case of Monkeypox — Chongqing Municipality, China, 2022 3. Retrospective Analysis of Monkeypox Infection.4. Comparative Proteomics of Human Monkeypox and Vaccinia Intracellular Mature and Extracellular Enveloped Virions

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