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隨著多參數(shù)流式細(xì)胞術(shù)（multi-parameterflowcytometry,MFC）的發(fā)展和完善，免疫細(xì)胞的精細(xì)化分型將在臨床實(shí)踐中發(fā)揮越來(lái)越重要的作用，在多個(gè)領(lǐng)域取得了顯著進(jìn)展，不僅提升疾病的診斷準(zhǔn)確性，還能夠指導(dǎo)治療決策，改善患者預(yù)后。

MFC精細(xì)化分型的臨床應(yīng)用

MFC通過(guò)增加更多參數(shù)進(jìn)行精細(xì)化分析，能夠提供更加全面、立體的免疫細(xì)胞信息，具有重要的臨床價(jià)值，主要包括以下幾個(gè)方面：

疾病篩查與診斷

● 精細(xì)化分型有助于早期識(shí)別淋巴瘤及腫瘤前驅(qū)病變，包括癌前病變和癌前狀態(tài)。

● 對(duì)于遺傳性和免疫缺陷性疾病的診斷也提供了更為準(zhǔn)確的基礎(chǔ)。

疾病進(jìn)程監(jiān)測(cè)

● 精細(xì)化分析可以揭示良性和惡性疾病的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程及其預(yù)后情況，與免疫細(xì)胞亞群的變化密切相關(guān)。

● 提供了動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)疾病變化的能力，特別是在治療前后對(duì)比個(gè)體的基礎(chǔ)值時(shí)尤為重要。

特殊治療后的免疫重建評(píng)估

● 在免疫治療和造血干細(xì)胞移植等特殊治療后，偏離規(guī)律性的免疫細(xì)胞亞群變化可能預(yù)示著疾病預(yù)后和并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)。

● 精細(xì)分型能夠幫助醫(yī)生更好地理解患者的免疫恢復(fù)狀況，優(yōu)化后續(xù)治療策略。

個(gè)性化醫(yī)療支持

● 通過(guò)精細(xì)化分型獲得的詳細(xì)信息，可以為每位患者制定個(gè)性化的治療方案，提高治療的有效性和針對(duì)性。

● 有助于建立更精確的個(gè)體化健康檔案，跟蹤長(zhǎng)期健康趨勢(shì)。

共識(shí)建議的免疫細(xì)胞精細(xì)化分型方案

在《中華預(yù)防醫(yī)學(xué)》2023年11月第57卷第11期發(fā)表的《基于多參數(shù)流式細(xì)胞術(shù)精細(xì)化分析外周血免疫細(xì)胞亞群的中國(guó)專家共識(shí)》中建議的適用于貝克曼庫(kù)爾特公司的流式細(xì)胞分析檢測(cè)技術(shù)平臺(tái)的精細(xì)化免疫細(xì)胞亞群8色方案如下，其他平臺(tái)可根據(jù)這個(gè)方案適當(dāng)調(diào)整。

Treg：調(diào)節(jié)性T細(xì)胞；DC：樹(shù)突狀細(xì)胞；TCR：T細(xì)胞受體；TCRVδ：T細(xì)胞受體δ鏈可變區(qū)；Th：輔助性T細(xì)胞；TRBC1：Ｔ細(xì)胞受體β鏈恒定結(jié)構(gòu)域。FITC為異硫氰酸熒光素，PE為藻紅蛋白，PE-Cy5.5為藻紅蛋白偶聯(lián)物，PE-CY7為藻紅蛋白偶聯(lián)物，APC為別藻青蛋白，APC-A750為別藻青蛋白偶聯(lián)物，PB為太平洋藍(lán)，KrO為科洛姆橙。

共識(shí)中方案的應(yīng)用，解讀文章如下：

免疫細(xì)胞精細(xì)分型重磅共識(shí)發(fā)布！世界免疫日，解碼“免疫力”！

精細(xì)化分型參考范圍

近日，《中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》2024年12月第47卷第12期發(fā)表的《多參數(shù)流式細(xì)胞術(shù)精細(xì)化免疫細(xì)胞亞群參考區(qū)間的建立》的文章中，根據(jù)這一共識(shí)中的方案，完成了326名表觀健康人免疫細(xì)胞亞群參考區(qū)間的制作，按照年齡分為18~40歲和41~60歲組，報(bào)告內(nèi)容包括了T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、單核細(xì)胞及DC細(xì)胞等不同類型的精細(xì)化亞群。

接下來(lái)我們一起來(lái)看一下具體的參考區(qū)間。

T淋巴細(xì)胞亞群參考區(qū)間范圍

覆蓋了常規(guī)T淋巴細(xì)胞亞群的大部分檢測(cè)項(xiàng)目，分為按照表型分類、按分化狀態(tài)分類、按活化及功能分類等幾大類型的細(xì)胞亞群的相對(duì)計(jì)數(shù)和絕對(duì)計(jì)數(shù)參考區(qū)間。

初始T細(xì)胞在老年人中的比例明顯下降，CD28的表達(dá)也出現(xiàn)顯著降低，而在終末分化的記憶性T細(xì)胞中的CD57表達(dá)則出現(xiàn)增高。本研究中，與18~40歲組相比，41~60歲組人群CD4+初始T細(xì)胞和CD4+中心記憶T細(xì)胞等一些衰老相關(guān)亞群均出現(xiàn)了顯著變化。

NK、DC、單核細(xì)胞及B細(xì)胞精細(xì)亞群

參考區(qū)間

包括B細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞亞群、單核細(xì)胞亞群和DC細(xì)胞亞群中常用的檢測(cè)群體的參考區(qū)間。文章研究得出，41-60歲組的成熟的NK亞群CD3?CD56lowCD16+更高，而在18-40歲組中未成熟的NK亞群CD3?CD56hiCD16?更高。DC細(xì)胞包括pDC和mDC亞群，pDC占DC細(xì)胞比例參考區(qū)間為5.0%~38.1%，41~60歲組比18~40歲組的pDC占比更低。

這套通過(guò)多參數(shù)流式細(xì)胞的方法建立了T、B、NK、單核、DC等免疫細(xì)胞精細(xì)亞群的參考區(qū)間，為日常工作開(kāi)展精細(xì)分型的檢測(cè)提供了參考依據(jù)。大家在實(shí)際的開(kāi)展中仍需注意不同儀器和試劑熒光素不同對(duì)結(jié)果的影響、實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證時(shí)應(yīng)充分考慮年齡因素、注意與臨床疾病應(yīng)用的結(jié)合。

參考文獻(xiàn)：

1.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會(huì). 基于多參數(shù)流式細(xì)胞術(shù)精細(xì)化分析外周血免疫細(xì)胞亞群的中國(guó)專家共識(shí)[J]. 中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志, 2023,57(11):1729-1747. 

2．谷春,王斐,李楠楠,等. 多參數(shù)流式細(xì)胞術(shù)精細(xì)化免疫細(xì)胞亞群參考區(qū)間的建立[J]. 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2024,47(12)：1411-1418.