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白油佐劑的選擇與乳化機頻率的確定

無錫意凱自動化技術(shù)有限公司.  2015-08-13  點擊681次

導(dǎo)讀:

目前禽流感的防控主要依靠滅活疫苗免疫按種,而白油佐劑被廣泛的應(yīng)用在禽用滅活疫苗的生產(chǎn)中.白油佐劑的質(zhì)量也直接影響著疫苗的免疫效果,劣質(zhì)礦物油甚至能造成雞群的生產(chǎn)性能下降.發(fā)病 和死亡,而優(yōu)質(zhì)的佐劑可以保證疫苗的質(zhì)量穩(wěn)定;使雞群產(chǎn)生較高的抗體.形成較長的保護期,且注射方便省力。因此.通過研究選擇優(yōu)質(zhì)的白油佐劑與乳化機頻率的探討對禽用油乳劑滅活疫茁的生產(chǎn)和使用具有重要的理論和實踐意義.

一材料與方法

1.主要材料

重組禽流感病毒(H9N2亞型,JY株)原液,由哈藥集團生物疫苗有限公司提供,禽流感病毒由H9亞型HI試驗抗原,由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所提供,21 – 28日齡SPF 雞,由山東濟南斯帕法斯家禽有限公司提供? SPF種蛋,哈藥集團生物疫苗有限公司自行孵化出雛飼養(yǎng)所需日齡。

2.主要試劑。

國內(nèi)外四個不同企業(yè)的白油編號為A. B, C、D.

3.主要儀器與設(shè)備

普通恒溫培養(yǎng)箱、干熱滅菌箱、八道數(shù)字式可調(diào)微址移液器.Tip頭.禽用負(fù)壓隔離器、孵化器、水平層流凈化工作臺、乳化機、黏度計、微量放血凝板. 微量振獲器等。

4.試驗方法

選擇國內(nèi)和國外四家白油A,B, C.D),并與乳化工藝中乳化機的三種頻率(30HZ,40HZ,50HZ)做交叉試驗,共制備出12種不同的配比試驗產(chǎn)品(表1 > ? 根據(jù)獸用生物制品生產(chǎn)和檢 驗規(guī)程,分別進行性狀檢驗.無菌檢驗、安全檢驗和效力檢驗,根據(jù)結(jié)果綜合評定用禽流感j y株的最優(yōu)白油佐劑及乳化機頻率?

二、結(jié)果與分析

1.性狀檢驗

12個樣品交叉試驗結(jié)果外觀均為乳白色乳狀液,油包水劑型,黏度測定B-40值最低,檢驗結(jié)采均合格(見衣2>, 但D-30 組表現(xiàn)粘度明顯高于其他白油所乳化的疫苗,在動物免疫時.可能會造成注射費力,吸收緩慢,應(yīng)激增大, 抗體低下,

2.無菌檢驗。

交叉試驗的12個樣品,經(jīng)TG小瓶3d后移植,TG、 CA. GP培養(yǎng)7d后無菌檢驗結(jié)果均為陰性,無菌生長(表略)。

3.安全檢驗。

交叉試驗的12個樣品的免疫雞只免疫后14d全部健活,且沒出現(xiàn)由因疫苗引起的局部和全身不良反應(yīng)(犮略h

4.效力檢驗。

效力檢驗結(jié)果:

A—30 為 8 ? 5 log2,B—30 為 8 ? 7 log2 ?

C-30 為 8.71og2,D-30 為 8.4 Iog2.

A-40 為8.91og2, B-40為9.11og2.

C-40為8.81og2. D-40為8_5tog2,

A-50為8.81og2. B-50為9.01og2,

C-50 為 8.81og2,D-50 為 8.61og2,

均達到國家標(biāo)準(zhǔn):免疫雞HI抗體效價均高于1:64 (61og2),對照雞HI抗體效價均低于 1 :4 (21og2)(表略)。最終確定B-40為最優(yōu)組合.乳化機頻率為40HZ。