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寶藏姜黃——看看步琦如何來挖寶！

步琦 2022-11-16 | 閱讀：664

寶藏姜黃——看看步琦如何來挖寶！

姜黃也被稱為郁金，是有很多功效的植物。姜黃能活血行氣，具有降血脂，抗腫瘤等作用。姜黃中主要的成分姜黃素是一種天然化合物，姜黃素是從姜科、天南星科中的一些植物的根莖中提取的一種二酮類化合物。其中，姜黃中約含姜黃素 3%～6%，姜黃素為橙黃色結(jié)晶粉末，味稍苦，不溶于水，在食品生產(chǎn)中也能用于腸類制品、罐頭、醬鹵制品等產(chǎn)品的著色。姜黃素具有降血脂、抗腫瘤、抗炎、利膽、抗氧化等作用，另外，也有科學(xué)家發(fā)現(xiàn)姜黃素有助治療耐藥結(jié)核病。在本文中利用全頻固液萃取儀 E-800 熱萃取法提取的，采用紫外/可見分光光度法測(cè)定姜黃素總含量。

儀器

BUCHI 全頻固液萃取儀 E-800
分析天平(精度 ± 0.1 mg)
紫外/可見分光光度計(jì)
BUCHI 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 R-100

試劑與樣品

95%乙醇
合成姜黃素

為了安全處理，請(qǐng)遵循相應(yīng)MSDS!

示例：有機(jī)姜黃素粉，標(biāo)記姜黃素含量:3.7%，樣品是粉末，因此不需要額外的均質(zhì)。

姜黃素含量的測(cè)定包括以下步驟

標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
姜黃粉直接提取
紫外/可見分光光度法測(cè)定姜黃素含量

3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

將 25mg 姜黃素倒入 100mL 的量瓶中，溶解并稀釋至乙醇。注意準(zhǔn)確的重量！
將 0.5 mL, 1 mL 和 2mL 原液轉(zhuǎn)移到三個(gè)不同的 100mL 容量燒瓶中，用乙醇定量。對(duì)于0.5 mL、1 mL和2 mL轉(zhuǎn)移的原液，這些標(biāo)準(zhǔn)溶液分別含有 1.25、2.5 和 5 mg/L 的姜黃素(根據(jù)確切重量而定)。
將萃取紙濾筒放入萃取腔支架中。
稱 0.1 克均勻樣品到萃取紙濾筒中。注意準(zhǔn)確的重量。
用棉絮覆蓋在萃取紙濾筒內(nèi)的樣品。
將含有樣品的纖維素頂針放入提取室，并將液位傳感器調(diào)整到樣品的高度。
將溶劑倒入燒杯中，放在相應(yīng)的加熱板上。
關(guān)閉防護(hù)罩，降下萃取架，激活萃取位置，打開冷卻水水龍頭或接通連接的冷水機(jī)。
根據(jù)表 1 中列出的參數(shù)啟動(dòng)熱提取。

表1：全頻固液萃取儀 E-800 熱萃取參數(shù)

步驟		加熱等級(jí)
萃取方法	熱萃取
溶劑	乙醇	上萃取腔 9 下加熱 18
萃取	2.5h/3h	熱萃取
淋洗	10min	18
干燥	AP	11
溶劑體積（mL）	120

提取液轉(zhuǎn)移到 100mL 容量瓶中。燒杯中的殘留成分用額外的乙醇沖洗，然后定容到 100 毫升。

注意：回收的溶劑應(yīng)單獨(dú)收集。再次使用前，通過測(cè)定吸光度來檢查溶劑中姜黃素的雜質(zhì)，并將其與純?nèi)軇┻M(jìn)行比較。如果有雜質(zhì)，必須使用純?nèi)軇╅_始清洗方法(例如淋洗30分鐘)來清洗索氏腔?；厥盏娜軇┛梢酝ㄟ^蒸餾收集和純化，例如使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 R-100。

3.2 UV / Vis 分光光度法

樣品溶液：將 2.0mL 的提取溶液轉(zhuǎn)移到 25mL 的量瓶中，用乙醇定容。測(cè)定樣品溶液的吸光度，并與乙醇在 425nm處的吸光度進(jìn)行了比較。

3.3 姜黃素的濃度與吸光度之間的關(guān)系可由以下方程得到

其中：

A：姜黃素類化合物在 425 nm 處的吸收率

a_n：標(biāo)準(zhǔn)溶液 n 在 425 nm 處的吸光度

d：光路長(zhǎng)度 (1 cm)

c_n：標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度 n，單位為 mg/L

3.4 姜黃素百分含量按下式計(jì)算

其中：

% Curcuminoids：樣品中姜黃素含量的百分比

m_Sample：樣品重量 [g]

c_s：樣品溶液的濃度為 mg/L

結(jié)果

用紫外/可見分光光度計(jì)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行分析。用線性回歸法確定了濃度與吸光度的相關(guān)性，該方法僅適用于標(biāo)準(zhǔn)溶液所涵蓋的范圍。

對(duì)于姜黃素的測(cè)定，姜黃樣品在 2.5h (150分鐘) 和 3 h(180分鐘) 提取時(shí)間內(nèi)進(jìn)行三次分析。結(jié)果如表2所示。

表2：姜黃粉中姜黃素含量測(cè)定結(jié)果

姜黃素含量測(cè)定值為 3.7%，與標(biāo)記值吻合較好。當(dāng)提取時(shí)間從 2.5 小時(shí)增加到 3 小時(shí)時(shí)，姜黃素含量并沒有增加，說明 2.5 小時(shí)后提取完全。用全頻固液萃取儀 E-800 測(cè)定姜黃粉中姜黃素含量，結(jié)果可靠，重復(fù)性好。6 位可同時(shí)進(jìn)行萃取，提高效率，每個(gè)位置獨(dú)立運(yùn)行。