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基本原理
它又稱單通道電流記錄技術(shù),用特制的玻璃微吸管吸附于細(xì)胞表面,使之形成10~100的密封(giga-seal),被孤立的小膜片面積為μm量級,內(nèi)中僅有少數(shù)離子通道。然后對該膜片實行電壓鉗位,可測量單個離子通道開放產(chǎn)生的pA(10安培)量級的電流,這種通道開放是一種隨機(jī)過程。通過觀測單個通道開放和關(guān)閉的電流變化,可直接得到各種離子通道開放的電流幅值分布、開放幾率、開放壽命分布等功能參量,并分析它們與膜電位、離子濃度等之間的關(guān)系。還可把吸管吸附的膜片從細(xì)胞膜上分離出來,以膜的外側(cè)向外或膜的內(nèi)側(cè)向外等方式進(jìn)行實驗研究。這種技術(shù)對小細(xì)胞的電壓鉗位、改變膜內(nèi)外溶液成分以及施加藥物都很方便。
用 途
金屬離子作用于細(xì)胞膜行為的研究細(xì)胞膜離子通道的性質(zhì)鑒定及其:
動力學(xué)研究
細(xì)胞分泌的研究
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究
分子生物學(xué)研究
應(yīng)用舉例
(1). 膜片鉗技術(shù)在通道研究中的重要作用
(2).與藥物作用有關(guān)的心肌離子通道
(3).對離子通道生理與病理情況下作用機(jī)制的研究
(4).對單細(xì)胞形態(tài)與功能關(guān)系的研究
(5).對藥物作用機(jī)制的研究
(6). 在心血管藥理研究中的應(yīng)用
(7). 創(chuàng)新藥物研究與高通量篩選
儀器主要組成及特點
1、Ti專業(yè)熒光顯微鏡圖像分析系統(tǒng)(機(jī)型可選);
2、Axopatch200B/700B電容反饋型膜片鉗;
3、數(shù)據(jù)采集卡軟件;
4、灌流系統(tǒng)(8通道,帶溫度控制)PS25-cell(可選)
5、成茂顯微操作系統(tǒng)(細(xì)胞)
6、電極拉針器;
7、防震臺含靜電屏蔽網(wǎng)
8、監(jiān)視器
暫無數(shù)據(jù)!