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1引言

2月22日，北京市疾控中心發(fā)布消息，當(dāng)前北京市流行的流感病毒中，甲型流感病毒感染占絕對優(yōu)勢，其中甲型H1N1亞型占64%，甲型H3N2占35%，乙型流感占1%。據(jù)某搜索指數(shù)，近七日以來，“甲流”的搜索及報道量呈顯著上升趨勢，僅2月24日，就有69417的搜索量。[1,2]甲流橫行，接種流感疫苗可預(yù)防甲型流感。

目前,甲流疫苗主要有三種類型：全病毒滅活疫苗［Influenza Vaccine（Whole Virion）,Inactivated；InfV-W］、裂解滅活疫苗［Influenza Vaccine（Split Virion），Inactivated；InfV-Sp］和亞單位滅活疫苗［Influenza Vaccine（Subunit），Inactivated；InfV-Su］等。

根據(jù)疫苗生產(chǎn)是否加入佐劑，又分為有/無佐劑疫苗。流感疫苗研究中應(yīng)用到的佐劑主要有鋁佐劑（氧化鋁、氫氧化鋁、磷酸鋁）、MF59、LTK63、新型佐劑等，甲流疫苗常用的佐劑為鋁佐劑。[3,4]

2鋁佐劑粒徑檢測

鋁佐劑是第一個被批準(zhǔn)用于人體的疫苗佐劑，用于增加機(jī)體對于疫苗的反應(yīng)，特別是增強(qiáng)抗體的產(chǎn)生，改善由于年齡、疾病或其他原因?qū)е乱呙绶磻?yīng)能力降低的問題。在免疫過程 中，通過將抗原吸附到佐劑上，使得抗原被攜載進(jìn)入機(jī)體從而誘導(dǎo)產(chǎn)生免疫應(yīng)答。采用鋁佐劑類型，往往會用氫氧化鋁或者磷酸鋁。氫氧化鋁是一種表面只有羥基基團(tuán)的層狀晶體，以纖維粒子形式存在，這種粒子聚集后以松散的形式存在，大小約1-10μm，只有佐劑顆粒的外層可以和抗原結(jié)合。磷酸鋁佐劑是羥基磷酸鋁復(fù)合物，為無定形結(jié)構(gòu)，初始顆粒的是直徑為50nm的盤狀結(jié)構(gòu)，然后形成大約3μm左右的松散粒子。

影響鋁佐劑應(yīng)答反應(yīng)的因素包括抗原佐劑的吸附率、吸附強(qiáng)度、佐劑顆粒大小及均一性，其中佐劑顆粒大小可影響對抗原的提取、轉(zhuǎn)運(yùn)及與抗原相互作用。[5]此外，還需關(guān)注過小的顆粒濃度，如果過小顆粒濃度過多，如低于100nm，幾十納米左右，那么注入體內(nèi)后可以穿過人體內(nèi)大部分細(xì)胞屏障，到達(dá)的人體部位更多更廣，由此造成的毒副作用會增加。在去年，輝瑞團(tuán)隊撰寫的關(guān)于《鋁佐劑疫苗的懸液性質(zhì)及表征》章節(jié)中，也提到了通過LumiSpoc關(guān)注小顆粒濃度。[6]

疫苗在實際應(yīng)用過程中，常用冷藏方式保護(hù)疫苗免于高溫破壞，但也有使疫苗暴露于過低溫度的風(fēng)險。含鋁佐劑的疫苗在經(jīng)冷凍后效價降低明顯。正常情況下，佐劑與抗原結(jié)合在一起。凍融后，佐劑與抗原之間的結(jié)合鍵會被破壞，導(dǎo)致佐劑與抗原脫離。分離的佐劑，會逐漸聚集，形成較大較重的顆粒，并慢慢沉淀于底部。失去佐劑的抗原，免疫原性大大降低、免疫效果大打折扣，疫苗也就失去了應(yīng)有的預(yù)防作用。同時，游離佐劑形成的大顆粒物質(zhì)，還會導(dǎo)致免疫副反應(yīng)的發(fā)生幾率升高[7]。因此，對于鋁佐劑大顆粒的監(jiān)控，大顆粒的控制也是穩(wěn)定工藝和避免不良反應(yīng)的監(jiān)控要點(diǎn)。

AccuSizer顆粒計數(shù)器系列

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圖6 AccuSizer A7000系列